固氮酶活性检测｜茁彩生物

      在自然界中，固氮微生物可以在固氮酶的作用下通过生物固氮作用（自生固氮、共生固氮或联合固氮的形式）将大气中的分子氮转化成氨，参与氮素循环。研究固氮微生物，不仅有利于氮肥的合理施用，而且有助于微生物肥料的研制。

微生物固氮研究、微生物肥料研制、土壤改良研究、代谢调控途径分析、微生物代谢产物研究等

检测原理：乙炔还原法（固氮酶可以将乙炔气体还原成乙烯气体）

检测平台：气相色谱仪-氢火焰离子检测器（GC-FID） 

土壤样品（≥8.0 g/样；若需测含水量≥10.0 g/样），干冰或冰袋运输。

根瘤样品（≥1.0 g/样），液氮速冻后置于-80℃保存，干冰运输。

       菌液（≥15 ml/样），无氮培养基活化后，冰袋运输。

    1.取盆栽土样 1- 5 g 于 100 mL 血清瓶中，加入 0. 1 mol/L 葡萄糖液 2 mL，塞上异丁基胶塞摇匀，加铝盖密封。用注射器从瓶中抽出 5 mL 空气再注入等体积乙炔气体，密封针眼，28 ℃培养 2 d。培养结束后，取 500 μL 气样在气相色谱仪上测定乙烯峰值。

       2.取0.1g-0.5g菌或0.5-1ml菌液 5于 100 mL 血清瓶中，加入 0. 1 mol/L 葡萄糖液 2 mL，塞上异丁基胶塞摇匀，加铝盖密封。用注射器从瓶中抽出 5 mL 空气再注入等体积乙炔气体，密封针眼，28 ℃培养 2 d。培养结束后，取 500 μL 气样在气相色谱仪上测定乙烯峰值。

        3.计算公式：

样品色谱图