鸟类多瘤病毒(APV)核酸检测试剂盒ㅣ茁彩生物
2023-04-11
本试剂盒根据鸟类多瘤病毒(Avian Polyoma Virus,APV)基因中的保守区设计引物,并对检测体系进行了针对性优化,可针对鸟类羽毛、血液、组织及口腔/泄殖腔拭子等样品中APV 的特异核酸片段进行PCR扩增,扩增产物可以直接进行琼脂糖凝胶电泳,以进行结果判定。
实验操作:
1. 样本制备(样本制备区)
请参照动物基因组DNA快速提取试剂盒(PCR分析用)说明书,或其他符合相关标准的核酸提取试剂盒/方法,对处理后的样本进行核酸提取。提取的样本核酸尽量及时进行检测,放置于冰盒中,否则于 4℃或-20℃保存。
2. 配制反应体系(加样区)
3. PCR扩增(扩增及产物分析区)
95℃预变性 5 分钟;94℃变性 45 秒,55℃退火 45 秒,72℃延伸 45 秒,共 35 个循环;72℃ 延伸 5 分钟;4℃保存。扩增产物先放置于 4℃(-20℃约 5 分钟)条件下充分冷却(15 分钟)
4. 琼脂糖凝胶电泳(以水平电泳琼脂糖凝胶制备为例)
注:制胶缓冲液和电泳缓冲液需一致。
于微波炉中或电磁炉上加热溶解。加热至溶液沸腾后,请戴上防热手套,小心晃动锥形瓶,如 此重复数次,直至琼脂糖完全溶解。
注:琼脂糖溶解过程采用多次短暂沸腾的方法,避免溶液过热暴沸。保证琼脂糖充分完 全溶解,以免造成电泳图像模糊不清。
5. 结果判定
判定为APV阳性。