Human HLA-C ELISA Kit（人类白细胞抗原C ELISA试剂盒）

▎  HLA-C 概述

HLA-C属于HLA I类重链同源。这种I类分子是由重链和轻链组成的异二聚体（β-2微球蛋白）。重链固定在膜中。I类分子通过呈递来自内质网内腔的肽在免疫系统中起着核心作用。它们几乎在所有细胞中都有表达。重链的分子量约为45kDa，其基因包含8个外显子。外显子1编码前导肽，外显子2和3编码α1和α2结构域，两者都结合肽，外外显子4编码α3结构域，外显体5编码跨膜区，而外显子6和7编码细胞质尾部。外显子2和外显子3内的多态性负责每个一类分子的肽结合特异性。骨髓和肾移植通常会对这些多态性进行分型。已经描述了大约6000个HLA-C等位基因。HLA系统在传染病的发生和结果中起着重要作用，包括由疟原虫、人类免疫缺陷病毒（HIV）和严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）引起的传染病。据报道，导致2019冠状病毒病（新冠肺炎）的新型冠状病毒SARS-CoV-2的结构刺突和核衣壳蛋白包含多个具有预测HLA限制的I类表位。个体HLA遗传变异可能有助于解释人群对病毒的不同免疫反应。

▎  别名

MHC; HLAC; HLC-C; D6S204; PSORS1; HLA-JY3

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中HLA-C浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的HLA-C , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.