▎  E-Cad 概述
E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad),该基因编码钙粘蛋白超家族中的一种经典钙粘蛋白。可变剪接会产生多种转录变体,其中至少有一种编码前原蛋白,该前原蛋白经过蛋白水解处理后会生成成熟的糖蛋白。这种钙依赖性细胞间粘附蛋白由五个细胞外钙粘蛋白重复序列、一个跨膜区和一个高度保守的细胞质尾组成。该基因突变与胃癌、乳腺癌、结直肠癌、甲状腺癌和卵巢癌相关。据认为,该基因功能丧失会增加增殖、侵袭和/或转移,从而促进癌症进展。该蛋白的胞外域介导细菌粘附到哺乳动物细胞上,而胞质域对于内化作用是必需的。该基因位于16号染色体上,与钙粘蛋白家族的其他成员一起构成一个基因簇。
▎  别名
UVO; CDHE; ECAD; LCAM; Arc-1; BCDS1; CD324
▎  用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 E-Cad浓度。
▎  检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
反应类型  | 双抗夹心法  | 
规格  | 96T/48T  | 
中文名称  |  人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒 | 
反应时间  | 1.5 h  | 
检测方法  | 酶联免疫吸附测定 | 
检测范围  | 25 ng/mL – 800 ng/mL | 
灵敏度
   | 1.0 ng/mL | 
上样体积  | 50 μL/孔  | 
样本类型
   | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本  | 
▎  特异性
可检测样本中的 E-Cad , 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎  重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎  标曲图

▎  批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎  批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎  精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎  稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎  试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
英文名称  | 中文名称  | 规格  | 规格  | 
Microelisa stripplate  | 包被微孔板  | 96T  | 48T  | 
Standard  | 标准品  | 0.3ml/管*6  | 0.3ml/管*6  | 
HRP-Corjugate  | HRP标记抗体  | 10mL  | 5mL  | 
Sample Diluent  | 样本稀释液  | 6mL  | 3mL  | 
Chromogen SolutionA  | 底物液A  | 6mL  | 3mL  | 
Chromogen SolutionB  | 底物液B  | 6mL  | 3mL  | 
Stop Solution  | 终止液    | 6mL  | 3mL  | 
20× Wash Solution  | 20×浓缩洗涤液  | 25mL  | 15mL  | 
Product Description  | 说明书  | 1份  | 1份  | 
Sealing film  | 封板膜  | 2张  | 2张  | 
▎  实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)  
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   
3、Eppendorf 移液器.   
4、蒸馏水或去离子水.   
5、脱脂棉吸水纸.   
6、37℃恒温箱.  
7、100ml和1000ml量筒.
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