▎  Plg 概述
纤溶酶原(Plg),该基因编码的纤溶酶原蛋白是一种丝氨酸蛋白酶,在血浆中以非活性的酶原形式循环,并通过多种纤溶酶原激活剂(如组织型纤溶酶原激活剂(tPA)、尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、激肽释放酶和XII因子(哈格曼因子))转化为活性蛋白酶——纤溶酶。纤溶酶原转化为纤溶酶涉及Arg-561和Val-562之间肽键的断裂。纤溶酶的裂解还会释放血管抑制素蛋白,该蛋白可抑制血管生成。纤溶酶可降解多种血浆蛋白,包括含纤维蛋白的血凝块。作为一种丝氨酸蛋白酶,纤溶酶除了纤维蛋白外,还可裂解多种产物,如纤连蛋白、血小板反应蛋白、层粘连蛋白和血管性血友病因子。纤溶酶可被α-2-巨球蛋白和α-2-抗纤溶酶等蛋白以及多种纤溶酶原激活剂的抑制剂灭活。纤溶酶原还与纤溶酶原受体相互作用,导致纤溶酶滞留在细胞表面并参与纤溶酶诱导的细胞信号传导。纤溶酶在细胞表面的定位在细胞外基质降解、细胞迁移、炎症、伤口愈合、肿瘤发生、转移、肌生成、肌肉再生、神经突生长和纤溶过程中发挥作用。该蛋白还可能在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中发挥作用,该综合征部分原因是血凝块形成增多和纤溶受到抑制。与其他哺乳动物相比,该基因所属的纤溶酶原样基因簇在类人猿灵长类动物中已发生重排。
▎  别名
HAE4
▎  用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中Plg浓度。
▎  检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
| 反应类型 | 双抗夹心法 | 
| 规格 | 96T/48T | 
| 中文名称 | 大鼠纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒 | 
| 反应时间 | 1.5 h | 
| 检测方法 | 酶联免疫吸附测定 | 
| 检测范围 | 10 μg/mL – 320 μg/mL | 
| 灵敏度
 | 1.0 μg/mL | 
| 上样体积 | 50 μL/孔 | 
| 样本类型
 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 | 
▎  特异性
可检测样本中的 Plg, 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎  重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎  标曲图

▎  批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎  批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎  精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎  稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎  试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
| 英文名称 | 中文名称 | 规格 | 规格 | 
| Microelisa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T | 
| Standard | 标准品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 | 
| HRP-Corjugate | HRP标记抗体 | 10mL | 5mL | 
| Sample Diluent | 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL | 
| Stop Solution | 终止液   | 6mL | 3mL | 
| 20× Wash Solution | 20×浓缩洗涤液 | 25mL | 15mL | 
| Product Description | 说明书 | 1份 | 1份 | 
| Sealing film | 封板膜 | 2张 | 2张 | 
▎  实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)  
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   
3、Eppendorf 移液器.   
4、蒸馏水或去离子水.   
5、脱脂棉吸水纸.   
6、37℃恒温箱.  
7、100ml和1000ml量筒.
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