Bovine ACTH ELISA Kit（牛促肾上腺皮质激素ELISA试剂盒）

▎  ACTH 概述

促肾上腺皮质激素(ACTH)，该基因编码一种前体蛋白，这种前体蛋白会通过被称为激素原转化酶的枯草杆菌素样酶的切割，经历广泛且具有组织特异性的翻译后加工。前体蛋白内有八个潜在的切割位点，并且根据组织类型和可用的转化酶，加工过程可能会产生多达十种具有不同细胞功能的生物活性肽。编码的蛋白质主要在腺垂体促肾上腺皮质激素细胞中合成，这些细胞利用四个切割位点；促肾上腺皮质激素对于正常的类固醇生成和维持正常的肾上腺重量至关重要，而β-脂解素是主要的终产物。在其他组织（包括下丘脑、胎盘和上皮组织）中，可能会利用所有的切割位点，从而产生在疼痛调节、能量稳态、黑素细胞刺激和免疫调节中起作用的肽。这些肽包括包含在促肾上腺皮质激素和β-脂解素肽内的几种不同的黑素细胞刺激素、脂解素和内啡肽。抗菌黑素细胞刺激素α肽具有抗菌和抗真菌活性。该基因的突变与早发性肥胖、肾上腺功能不全和红色头发色素沉着有关。已发现编码相同蛋白质的替代剪接转录变体。

▎  别名

LPH; MSH; NPP; POC; CLIP; OBAIRH

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中ACTH 浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的ACTH , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.