▎  HSP-90 概述
启用多种功能,包括ATP水解活性;蛋白磷酸酶5结合活性;以及蛋白磷酸酶激活剂活性。参与了几个过程,包括确定成年寿命;细胞核蛋白质输出;以及蛋白质稳定。位于细胞质的核周区域。含蛋白质复合物的一部分。表现为几种结构,包括排泄系统;种系;头部;肠;咽。用于研究心血管系统疾病。该基因的人类直系同源基因与多发性硬化症有关。与包括HSP90AB1(热休克蛋白90α家族B类成员1)在内的几个人类基因同源。
▎  用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 HSP-90 浓度。
▎  检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
| 反应类型 | 双抗夹心法 | 
| 规格 | 96T/48T | 
| 中文名称 | 牛热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 | 
| 反应时间 | 1.5 h | 
| 检测方法 | 酶联免疫吸附测定 | 
| 检测范围 | 62.5 pg/mL – 2000 pg/mL | 
| 灵敏度
 | 10 pg/mL | 
| 上样体积 | 50 μL/孔 | 
| 样本类型
 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 | 
▎  特异性
可检测样本中的 HSP-90  , 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎  重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎  标曲图

▎  批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎  批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎  精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎  稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎  试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
| 英文名称 | 中文名称 | 规格 | 规格 | 
| Microelisa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T | 
| Standard | 标准品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 | 
| HRP-Corjugate | HRP标记抗体 | 10mL | 5mL | 
| Sample Diluent | 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL | 
| Stop Solution | 终止液   | 6mL | 3mL | 
| 20× Wash Solution | 20×浓缩洗涤液 | 25mL | 15mL | 
| Product Description | 说明书 | 1份 | 1份 | 
| Sealing film | 封板膜 | 2张 | 2张 | 
▎  实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)  
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   
3、Eppendorf 移液器.   
4、蒸馏水或去离子水.   
5、脱脂棉吸水纸.   
6、37℃恒温箱.  
7、100ml和1000ml量筒.