▎  DBH;β-DH 概述
该基因编码的蛋白质是一种氧化还原酶,属于铜II型,抗坏血酸依赖性单加氧酶家族。编码的蛋白质在神经分泌囊泡和肾上腺髓质的嗜铬颗粒中表达,催化多巴胺转化为去甲肾上腺素,去甲肾上腺素既是一种激素,也是交感神经系统的主要神经递质。该基因编码的酶以可溶性和膜结合形式存在,分别取决于信号肽的存在与否。该基因的突变导致人类患者多巴胺β-羟基化物缺乏,其特征是自主神经和心血管功能缺陷,包括低血压和上睑下垂。该基因的多态性可能在多种精神疾病中起作用。
▎  别名
DBM; ORTHYP1
▎  用途
该试剂盒采用竞争法检测血清、血浆、细胞培养上清液中斑马鱼多巴胺-β羟化酶(DBH;β-DH)的浓度。
▎  检测原理
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记dbh,纯化的抗dbh抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生物素标记dbh及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生物素标记的dbh结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物素标记的dbh结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物素化dbh,再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生物素化dbh -酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着dbh浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对血清中dbh的减少或升高有可靠的检出性能。
| 反应类型 | 竞争法 | 
| 规格 | 96T/48T | 
| 中文名称 | 
 斑马鱼多巴胺-β羟化酶(DBH;β-DH)ELISA试剂盒 | 
| 反应时间 | 1.5 h | 
| 检测方法 | 酶联免疫吸附测定 | 
| 检测范围 | 0.5 pg/mL – 16 pg/mL | 
| 灵敏度
 | 0.1pg/mL | 
| 上样体积 | 50 μL/孔 | 
| 样本类型
 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 | 
▎  特异性
可检测样本中的 DBH;β-DH , 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎  重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎  标曲图

▎  批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎  批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎  精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎  稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎  试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
| 英文名称 | 中文名称 | 规格 | 规格 | 
| Microelisa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T | 
| Standard | 标准品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 | 
| HRP-Corjugate | HRP标记抗体 | 10mL | 5mL | 
| Sample Diluent | 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL | 
| Stop Solution | 终止液   | 6mL | 3mL | 
| 20× Wash Solution | 20×浓缩洗涤液 | 25mL | 15mL | 
| Product Description | 说明书 | 1份 | 1份 | 
| Sealing film | 封板膜 | 2张 | 2张 | 
▎  实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)  
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   
3、Eppendorf 移液器.   
4、蒸馏水或去离子水.   
5、脱脂棉吸水纸.   
6、37℃恒温箱.  
7、100ml和1000ml量筒.