Mouse Plg ELISA Kit （小鼠纤溶酶原ELISA试剂盒）

▎  Plg 概述

纤溶酶原(Plg)，该基因编码的纤溶酶原蛋白是一种丝氨酸蛋白酶，在血浆中以非活性的酶原形式循环，并通过多种纤溶酶原激活剂（如组织型纤溶酶原激活剂（tPA）、尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）、激肽释放酶和XII因子（哈格曼因子））转化为活性蛋白酶——纤溶酶。纤溶酶原转化为纤溶酶涉及Arg-561和Val-562之间肽键的断裂。纤溶酶的裂解还会释放血管抑制素蛋白，该蛋白可抑制血管生成。纤溶酶可降解多种血浆蛋白，包括含纤维蛋白的血凝块。作为一种丝氨酸蛋白酶，纤溶酶除了纤维蛋白外，还可裂解多种产物，如纤连蛋白、血小板反应蛋白、层粘连蛋白和血管性血友病因子。纤溶酶可被α-2-巨球蛋白和α-2-抗纤溶酶等蛋白以及多种纤溶酶原激活剂的抑制剂灭活。纤溶酶原还与纤溶酶原受体相互作用，导致纤溶酶滞留在细胞表面并参与纤溶酶诱导的细胞信号传导。纤溶酶在细胞表面的定位在细胞外基质降解、细胞迁移、炎症、伤口愈合、肿瘤发生、转移、肌生成、肌肉再生、神经突生长和纤溶过程中发挥作用。该蛋白还可能在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中发挥作用，该综合征部分原因是血凝块形成增多和纤溶受到抑制。与其他哺乳动物相比，该基因所属的纤溶酶原样基因簇在类人猿灵长类动物中已发生重排。

▎  别名

HAE4

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中Plg 浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的 Plg , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.