Mouse STAT3 ELISA Kit（小鼠信号传导子及转录激活子3 ELISA试剂盒）

▎  STAT3 概述

信号传导转录激活因子3(STAT3)，该基因编码的蛋白质属于信号传导及转录激活因子（STAT）蛋白家族的一员。作为对细胞因子和生长因子的响应，STAT家族成员会被受体相关激酶磷酸化，然后形成同源或异源二聚体，转移到细胞核内，作为转录激活因子发挥作用。该蛋白质可通过磷酸化对各种细胞因子和生长因子（包括干扰素（IFNs）、表皮生长因子（EGF）、白细胞介素5（IL5）、白细胞介素6（IL6）、肝细胞生长因子（HGF）、白血病抑制因子（LIF）和骨形态发生蛋白2（BMP2））作出响应而被激活。该蛋白质可介导细胞受刺激后多种基因的表达，从而在细胞生长和凋亡等许多细胞过程中发挥关键作用。已有研究表明，小GTP酶Rac1可结合并调节该蛋白质的活性。PIAS3蛋白是该蛋白质的特异性抑制剂。该基因还在调节宿主对病毒和细菌感染的反应中发挥作用。该基因的突变与婴儿期发病的多系统自身免疫性疾病和高免疫球蛋白E综合征相关。

▎  别名

APRF; HIES; ADMIO; ADMIO1

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中STAT3  浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的STAT3  , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.