Human ANK1 ELISA Kit （人锚定蛋白1 ELISA试剂盒）

▎  ANK1 概述

锚蛋白是一个蛋白质家族，将完整的膜蛋白与潜在的收缩蛋白-肌动蛋白细胞骨架联系起来，并在细胞运动、激活、增殖、接触和维持专门的膜结构域等活动中发挥关键作用。对各种靶蛋白具有不同亲和力的锚蛋白的多种亚型以组织特异性、发育调节的方式表达。大多数锚蛋白通常由三个结构域组成：氨基末端结构域包含多个锚蛋白重复序列；具有高度保守的血影蛋白结合结构域的中心区域；以及羧基末端调控结构域，其保守度最低且易发生变异。Ankyrin 1是该家族的原型，最初在红细胞中发现，但此后也在大脑和肌肉中发现。大约一半的遗传性球形红细胞增多症患者存在红细胞锚蛋白1突变。已经描述了调节结构域中选择性剪接的复杂模式，导致锚蛋白1的不同亚型。还发现了由使用替代启动子引起的锚蛋白1的截短肌肉特异性亚型。

▎  别名

ANK; SPH1; SPH2; ankyrin-1

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中ANK1浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的ANK1, 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.