▎  α-SYN 概述
α-突触核蛋白是突触核蛋白家族的成员,该家族还包括β-和γ突触核蛋白。突触核蛋白在大脑中大量表达,α和β突触核蛋白选择性抑制磷脂酶D2。SNCA可能有助于整合突触前信号和膜运输。SNCA的缺陷与帕金森病的发病机制有关。SNCA肽是阿尔茨海默病患者大脑中淀粉样斑块的主要成分。或者,编码不同异构体的剪接转录本已被鉴定为该基因。
▎  别名
PD1; NACP; PARK1; PARK4;SNCA
▎  用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中α-SYN浓度。
▎  检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
| 反应类型 | 双抗夹心法 | 
| 规格 | 96T/48T | 
| 中文名称 | 人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒 | 
| 反应时间 | 1.5 h | 
| 检测方法 | 酶联免疫吸附测定 | 
| 检测范围 | 1.25 ng/mL – 40 ng/mL | 
| 灵敏度
 | 0.49 ng/mL | 
| 上样体积 | 50 μL/孔 | 
| 样本类型
 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 | 
▎  特异性
可检测样本中的α-SYN , 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎  重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎  回收率
分别于定量血清或血浆样本中加入一定量的α-SYN(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。
| 样本 | 回收率范围(%) | 平均回收率(%) | 
| 血清(n=5) | 84-108 | 97 | 
| EDTA血浆(n=5) | 87-109 | 97 | 
| 肝素血浆(n=5) | 90-106 | 100 | 
▎  标曲图

▎  线性
在定值血清及血浆样本内加入适量的α-SYN,并倍比稀释成 1:2,1:4,1:8,1:16 的待测样本,线性范围即为稀释后样本中α-SYN含量的测定值与理论值的比率。
| 样本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 | 
| 血清(n=5) | 87-105 % | 84-108 % | 87-111 % | 94-110 % | 
| EDTA血浆(n=5) | 88-102 % | 86-108 % | 86-106 % | 90-104 % | 
| 肝素血浆(n=5) | 90-104 % | 92-104 % | 91-109 % | 86-98 % | 
▎  批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎  批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎  精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎  稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎  试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
| 英文名称 | 中文名称 | 规格 | 规格 | 
| Microelisa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T | 
| Standard | 标准品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 | 
| HRP-Corjugate | HRP标记抗体 | 10mL | 5mL | 
| Sample Diluent | 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL | 
| Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL | 
| Stop Solution | 终止液   | 6mL | 3mL | 
| 20× Wash Solution | 20×浓缩洗涤液 | 25mL | 15mL | 
| Product Description | 说明书 | 1份 | 1份 | 
| Sealing film | 封板膜 | 2张 | 2张 | 
▎  实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)  
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   
3、Eppendorf 移液器.   
4、蒸馏水或去离子水.   
5、脱脂棉吸水纸.   
6、37℃恒温箱.  
7、100ml和1000ml量筒.
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