细胞耗氧率检测试剂盒(R01荧光探针法-OCR）

▎  产品简介

茁彩细胞氧气消耗检测试剂盒（Oxygen Consumption Assay Kit / Oxygen Consumption Rate Assay Kit / OCR Assay Kit）是利用茁彩合成的合成的特异性耗氧气荧光探针R01来检测细胞外耗氧情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行耗氧量测定。

耗氧量分析是研究代谢的有用工具。耗氧量测量结果是细胞代谢功能，更具体而言是线粒体功能的关键性指示。通过这类指标来探究活细胞代谢，可为细胞功能以及代谢变化在疾病进展中的作用提供深入洞察。线粒体功能对细胞代谢、存活和能量产生至关重要。线粒体呼吸受损与病理状态（如癌症、缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病）有关。线粒体毒性也是安全相关的抗药性和药物戒断症状的常见原因。

耗氧气荧光探针R01耗氧量分析可以实时测量全细胞或分离线粒体的耗氧量，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞呼吸以及评估治疗对线粒体功能毒性作用的一种可靠方法。

它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行有氧代谢的简单动力学测定。随着呼吸作用的进行，溶解氧被消耗，样品中的氧气浓度降低，导致 耗氧气荧光探针R01分析的信号增加，从而实现对耗氧量的测定。

▎  常见问题分析

1.耗氧率检测趋势跟预期的不一致？

可以从以下方面改善：

检查细胞接种和移液的一致性。

增加细胞密度。

将测定体积减少到60微升。

在某些较短的检测时间区间内，会出现荧光数据的波动情况，出现斜率下降或不变化，需要

扩大到更长的时间范围内来分析耗氧率趋势。一般检测时间范围不少于30分钟。 温度对检测有较大影响。有条件的话，务必使用配有温度控制的酶标仪，仪器以及所有培养基和储备溶液均须使用前37℃预热。注意某些读板器的温度控制不一致，如果存在这种情况，请考虑将测定和平衡温度降低到30℃，避开外圈。

2.使用的细胞类型灵敏度不够？

可以考虑以下改善方案： 增加酶标仪的增益（PMT）设置。 在无酚红或无血清的情况下测定。

增加 R01氧荧光探针的体积（至10 μL/孔）。

减少 R01氧荧光探针的体积（至2 μL/孔）。

增加细胞密度。

将测定体积减少到60微升。

测量底部读数（如果有）。

调整焦距。

3.我无法在含有细胞的孔中检测到任何信号，或者我可以检测到信号，但斜率(速率)显得

很低?

检查正确的仪器设置，设置信号优化。

增加细胞密度。

将测定体积减少到60微升。

4.开始测定时荧光强度出现下降趋势?

有些细胞模型样本刚开始测定的一小段时 间内可能出现荧光强度下降的情况，一般10分

钟左右。可以等荧光平衡后开始上升的时间点作为起点。