全蛋白提取试剂盒   一键复制产品信息

▎  产品简介

全蛋白提取试剂盒由蛋白提取试剂、磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF组成，用于对哺乳动物组织和培养细胞进行匀浆裂解，从中提取全蛋白。本产品作用温和，提取过程简便高效，获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

▎  注意事项

1、所有的试剂及器具均需预冷后使用，以保持蛋白质的完整性和活性。细胞裂解的操作应置于冰上或4℃进行。

2、蛋白提取试剂含有特殊成分，在低温情况下可能出现浑浊现象，可37℃水浴促其溶解，不影响使用效果；溶解时间不易过长，避免成分失效，4度保存即可，长期不用亦可-20℃保存。

3、PMSF溶液可置4℃保存1~2周，-20℃可保存1年以上，室温放置2天即可能失效。 另外，PSMF(有毒)需现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。

4、如果细胞量较多，必需分装成50～100万细胞/离心管，然后再裂解，大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。

5、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈Vortex使样品裂解充分，然后同样离心取上清用于后续实验，直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器裂解的充分。

6、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量或增加样品量。

7、除振荡裂解外，亦可采用超声破碎法，每次30s，间隔1min，连续超声3~4次，置于冰上冷却。超声破碎细胞后应镜检，细胞破碎率不小于90％。

8、一般常规提取的蛋白样品，进行后续试验不需要透析，但如果需要较大量的提取蛋白或后续试验结果不理想，则需要将提取的蛋白样品进行透析脱盐。

9、对于提取的蛋白质可以采用BCA蛋白定量试剂盒、Bradford蛋白定量试剂盒或微量BCA蛋白定量试剂盒对提取样品中的蛋白质进行定量。10、对胶上的蛋白质进行染色，可以采用常规考马斯亮蓝染色试剂盒或考马斯亮蓝快速染色液(免脱色)来染色。

11、裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象，该透明胶状物为含有基因组DNA等复合物，在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。

12、使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。

13、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

14、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效；低温运输，按要求保存。